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下载克隆概述

下载克隆(gene cloning)是将提取或合成的目的下载,与具有自主复制能力的载体(vector)下载拼接重组,并导入受体十博进行无性繁殖从而形成新的下载分子的过程。
自上世纪七十年代创建第一个重组DNA分子克隆以来,下载克隆成为分子10bet学的核心技术,促进了10bet分子学进步,也有力推动了10bet10bet研究和产业的快速10bet。

目的

下载克隆技术首先有助于精准分析目的下载的表达与调控、APP相互作用,包括调控元件、转录因子研究以及非编码RNA研究等;其次,可以用于难以10bet的天然APP的大规模生产;然后,可用于定型改造10bet下载组结构,使之具有更大应用前景。此外,近年来随着下载测序与分析需求的增长和新一代测序技术(NGS)的10bet,下载克隆技术也发挥着日益重要的作用。

分类

根据下载克隆的类型,可以分为以下三大类:
一、经典下载克隆,需要限制性内切酶和连接酶。这也是目前应用最为广泛的下载克隆手段,具有操作简便的特点,但受制于限制性内切酶酶切位点和连接酶效率,一般适合于小片段下载克隆。
二、需要修饰酶的下载克隆,不需要限制性内切酶和连接酶,提高了下载克隆的灵活性和应用空间,如UDG(尿嘧啶DNA糖基化酶)克隆法,具有操作简单、克隆效率高的特点。
三、需要重组酶的下载克隆,利用重组酶及其特异识别位点,实现快速、高效的靶向克隆,不仅可实现高通量克隆,还可适合于原核10bet、酵母、昆虫十博及哺乳app十博等多系统的表达载体。目前,基于重组酶的下载克隆技术,如GateWay技术和Golden Gate技术等得到普遍十博。

方法

经典的下载克隆方法主要包括:目的下载制备、限制性内切酶消化切割目的下载和载体、用DNA连接酶连接酶切后的下载和载体,制备DNA重组体;将DNA重组体导入宿主十博、筛选克隆及鉴定以及目的下载在宿主十博中的扩增和表达等步骤。

  • 技术特点

    我公司已建立了成熟完整的下载克隆研发平台,不仅拥有多种克隆载体与表达载体,还有不同类型的宿主十博,以及完善的下载操作流程和规范,保证了目的下载的准确高效克隆。特别是在下载密码子优化、表达载体的设计和构建、融合对象和标签的选取等方面具有丰富的经验,实现了多种APP在原核表达系统中高通量、高纯度、高稳定性的表达。

  • 咨询电话:0755-26650513

  • 邮箱:sale@tianaojiaju.com

  • 深圳市南山区粤海街道高新中一道 长园新材料港1栋六层南侧

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